ساخت و تکثیر cdna از mrna ژن رمز گردان آنزیم p5cs گیاه arabidopsis thaliana

نویسندگان

علیرضا عباسی

فردوس رستگارجزی

بهمن یزدی صمدی

اشرف الدین سخن سنج

چکیده

گیاهان وقتی در معرض خشکی و شوری قرار می گیرند با تنش اسمزی مواجه می شوند که برای مقابله با تنش اسمزی ایجاد شده تجمع اسمولیتهایی همچون پرولین ، گلیسین بتانین و یا سایر ترکیبات مشابه را افزایش می دهند.در مسیر بیوسنتز این اسمولیتها آنزیمهایی دخالت دارند که بعضی از آنها کلیدی به حساب می آیند و با تغییر در تظاهر ژنهایی که این آنزیمها را کد می کنند می توان فراوردة نهایی که اسمولیت مورد نظر می‍‍باشد را افزایش داد. این تحقیق بر روی آنزیم دلتا ـ1ـ پرولین ـ5ـ کربوکسیلات سنتتاز (p5cs ) که یکی از آنزیم های کلیدی در مسیر بیوسنتز پرولین می‍باشد ، انجام شد . ابتدا اقدام به ساخت cdna از روی mrna حاصل از گیاه آرابیدوپسیس تالیانا (arabidopsis thaliana) گردید . برای اینکار rna کل از برگهای گیاه آرابیدوپسیس تالیانا (arabidopsis thaliana )، که در معرض تنش شوری قرار گرفته بود ، استخراج گردید و سپس با استفاده از آنزیم رونویسی معکوس اقدام به ساخت dna مکمل شد و کل mrna به cdna تبدیل گردید و با دو جفت آغازگر اختصاصی به طولهای 27 و 35 نوکلئوتید ، و به کمک دستگاه ترموسایکلر، cdna مربوط به آنزیم p5cs دو رشته ای گردید و تکثیر شد.برای جفت پرایمر به ترتیب در انتهای َ5 ، مکان برشی برای آنزیم های ecori و bamhi در نظر گرفته شد تا در همسانه سازی cdna تکثیر شده مشکلی وجود نداشته باشد . سپس با استفاده از پروب صحت انجام کار به تأیید رسید.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ساخت و تکثیر cDNA از mRNA ژن رمز گردان آنزیم P5CS گیاه Arabidopsis thaliana

گیاهان وقتی در معرض خشکی و شوری قرار می گیرند با تنش اسمزی مواجه می شوند که برای مقابله با تنش اسمزی ایجاد شده تجمع اسمولیتهایی همچون پرولین ، گلیسین بتانین و یا سایر ترکیبات مشابه را افزایش می دهند.در مسیر بیوسنتز این اسمولیتها آنزیمهایی دخالت دارند که بعضی از آنها کلیدی به حساب می‌آیند و با تغییر در تظاهر ژنهایی که این آنزیمها را کد می کنند می توان فراوردة نهایی که اسمولیت مورد نظر می‍‍باشد ...

متن کامل

Yeast Two Hybrid cDNA Screening of Arabidopsis thaliana for SETH4 Protein Interaction

SETH4 coding sequence with 2013 bp is a member of gene family expressed in gametophytic tissues of Arabidopsis thaliana. This fragment was PCR amplified using Kod Hi Fi DNA polymerase enzyme. This fragment was cloned into pGBKT7 bate vector and transformed E. coli DH5? cells containing vector were selected on LB medium containing Kanamycin. Finally, pGBKT7-SETH4 bate was transformed into yeast ...

متن کامل

کنترل ژنتیکی گلدهی در گیاه آرابیدوپسیس (Arabidopsis thaliana)

انتقال از رشد رویشی به فاز زایشی از تحولات مهم در زندگی گیاهان می‌باشد. این پدیده در گیاهان عالی تحت تاثیر بسیاری از عوامل ژنتیکی و فیزیولوژیکی می‌باشد. شناسایی این عوامل یکی از اهداف مهم در اصلاح بسیاری از گیاهان می‌باشد. در دهه‌های اخیر گیاه آرابیدوپسیس به عنوان یک گیاه مدل در بسیاری از مطالعات مربوط به عمل گلدهی به کار رفته است و بسیاری از مسیرهای مربوط به کنترل گلدهی در این گیاه مشخص شده اس...

متن کامل

کنترل ژنتیکی گلدهی در گیاه آرابیدوپسیس (Arabidopsis thaliana)

انتقال از رشد رویشی به فاز زایشی از تحولات مهم در زندگی گیاهان می‌باشد. این پدیده در گیاهان عالی تحت تاثیر بسیاری از عوامل ژنتیکی و فیزیولوژیکی می‌باشد. شناسایی این عوامل یکی از اهداف مهم در اصلاح بسیاری از گیاهان می‌باشد. در دهه‌های اخیر گیاه آرابیدوپسیس به عنوان یک گیاه مدل در بسیاری از مطالعات مربوط به عمل گلدهی به کار رفته است و بسیاری از مسیرهای مربوط به کنترل گلدهی در این گیاه مشخص شده اس...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله علوم کشاورزی ایران

ناشر: پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران

ISSN

دوره 34

شماره 3 2003

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023